تکثیر، توالی یابی و کلون سازی ژن مولد آلفاآمیلاز باکتری باسیلوس در مخمر ساکارومایسس
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده علوم پایه
- نویسنده بی بی فهیمه افضل جوان
- استاد راهنما محسن مبینی دهکردی بهناز صفار
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1390
چکیده
در این پژوهش ژن کدکننده آلفا-آمیلاز باکتری باسیلوس سابتیلیس بومی با استفاده از روش pcr با پرایمرهای اختصاصی دارای جایگاه برش آنزیم های محدودگر noti و asci تکثیر شد و مورد توالی یابی قرارگرفت. توالی حاصل از pcr و وکتور شاتل-اپی زومال p316tdh3 با استفاده از آنزیم های محدودگر بریده و تحت عمل آنزیم لیگاز t4 به یکدیگر متصل شدند. وکتور نوترکیب حاصل وارد اشریشیاکلای شد. در مرحله بعد حضور ژن آلفا-آمیلاز در میزبان پروکاریوتی با روش colony-pcr مورد تایید قرار گرفت و وکتور استخراج شده از میزبان فوق با حضور پلی اتیلن گلایکول 3350 و ناقل dna به میزبان یوکاریوتی ساکارومایسس سرویزیه انتقال یافت. سویه مخمری نوترکیب به وسیله مارکر بیوسنتزی ura3 غربال شد و حضور ژن مورد بررسی قرار گرفت. در ادامه نتایج حاصل از توالی یابی ژن تکثیر شده آلفا-آمیلاز باسیلوس سابتیلیس بومی ترادف 1887 جفت بازی را نشان داد که در مقایسه با ترادف ژن سویه های استاندارد گزارش شده، 65/93% یکسانی را در سطح نوکلئوتیدی نشان می دهد. بر اساس شباهت موجود و سایر بررسی های بیوانفورماتیکی، ژن آلفا-آمیلاز مذکور می تواند در میزبان ساکارومایسس سرویزیه بیان گردد.
منابع مشابه
کلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی
سابقه و هدف: آنزیم L - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم‌ترین باکتری‌های مولد این آنزیم باکتری‌های اشریشیا کلی و گونه‌های مختلف اروینیا به‌ویژه اروینیا کریزانتمی می‌باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم L-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی DSM 4610 بود. مواد و روش‌ها: در ابتدا DNA ژنومی باکتری...
متن کاملکلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی
سابقه و هدف: آنزیم L - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم‌ترین باکتری‌های مولد این آنزیم باکتری‌های اشریشیا کلی و گونه‌های مختلف اروینیا به‌ویژه اروینیا کریزانتمی می‌باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم L-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی DSM 4610 بود. مواد و روش‌ها: در ابتدا DNA ژنومی باکتری...
متن کاملجداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز باکتری ترموبیفیدا فوسکا
سابقه و هدف: آنزیم کوتیناز متعلق به خانواده سرین هیدرولازها است و به دلیل خواص ساختاری و عملکردی در حذف آلودگی های زیست محیطی اهمیت بسیار زیادی دارد. هدف از این پژوهش، جداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز از باکتری ترموبیفیدا فوسکا (Thermobifida fusca) بود. مواد و روش‌ها: نمونه برداری از خاک های جنگلی شمال ایران صورت گرفت. با استفاده از محیط کشت اخت...
متن کاملکلونینگ و تعیین توالی ژن انتقال‌دهنده هگزوز 2 (HXT2) از مخمر ساکارومایسس سرویزیه سویه ایرانی
سابقه و هدف: ساکارومایسس سرویزیه دارای 20 ژن کدکننده پروتئین‌های انتقال‌دهنده هگزوز شامل HXT1 ، HXT17 ، GAL2 ، SNF3 و RGT2 می‌باشد. از میان این خانواده ژنی، هفت ژن ( HXT7-HXT1 ) نقش مهمی در فرآیند تولید الکل دارند. هدف این مطالعه شناسایی و جداسازی ژن HXT2 از ژنوم مخمر ساکارومایسس سرویزیه از طریق PCR و کلونینگ آن در وکتور دارای پروموتور بیانی مناسب به منظور پایه‌ای برای طراحی پلاسمید بیانی و ...
متن کاملجداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز باکتری ترموبیفیدا فوسکا
سابقه و هدف: آنزیم کوتیناز متعلق به خانواده سرین هیدرولازها است و به دلیل خواص ساختاری و عملکردی در حذف آلودگی های زیست محیطی اهمیت بسیار زیادی دارد. هدف از این پژوهش، جداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز از باکتری ترموبیفیدا فوسکا (Thermobifida fusca) بود. مواد و روش‌ها: نمونه برداری از خاک های جنگلی شمال ایران صورت گرفت. با استفاده از محیط کشت اخت...
متن کاملکلون سازی مولکولی ژن های luxA وluxB باکتری Vibrio fischeri
پرتوافکنی زیستی در باکتری ها پدیده ای است که توسط آنزیم های لوسی فراز سازماندهی می گردد. این آنزیم ها به صورت هترودایمری متشکل از زیر واحدهای α و β هستند که توسط ژن های luxA و luxB رمز شده و همراه با ژن های luxCDE رمز کننده پروتئین های مورد نیاز جهت سنتز سوبسترای آلدئیدی، اپران lux باکتریVibrio fischeri را تشکیل می دهند. در تحقیق حاضر ناحیه کروموزومی واجد ژن های luxA و luxB باکتری Vibri...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده علوم پایه
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023